利用壓力循環(huán)技術(shù)從土壤中提取病原DNA（PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備）

更新時(shí)間：2009-06-04 點(diǎn)擊次數(shù)：1849

領(lǐng)域：分子診斷用于植物病理學(xué) 關(guān)鍵詞:PCT 壓力循環(huán)技術(shù) 樣品制備細(xì)胞破碎

在低密度病原及一些較難提取樣品中，檢測(cè)及定量分析絲核菌、腐霉菌及其它通過(guò)土壤傳播的病原體時(shí)，盡管利用的是快速診斷裝置如實(shí)時(shí)定量PCR，但結(jié)果極其不穩(wěn)定。原因在于，樣品制備在生物樣品制備過(guò)程中一直是一個(gè)瓶頸。一些特殊的DNA，RNA及小分子采用傳統(tǒng)的方法無(wú)法有效地提取出來(lái)。目前，哈佛的科學(xué)家們發(fā)明了種全新的儀器：PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統(tǒng)，可以有效地解決這個(gè)問(wèn)題。該系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)在于：重現(xiàn)性好，效率高，快速，安全，平行性好。

這套系統(tǒng)中，樣品在特定條件下被置于流體靜壓循環(huán)中（從周界壓力到35000psi），以此來(lái)提高從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的提取率。這項(xiàng)全新的技術(shù)——壓力循環(huán)技術(shù)（PCTPRESSURE CYCLING TECHNOLOGY），與其它方法相比，可以將從土壤中提取絲核菌、腐霉菌中DNA的效率提高2-30倍。利用PCT SPS壓力循環(huán)樣品制備系統(tǒng)，我們從小麥根部獲得可檢測(cè)的絲核菌DNA，這種小麥根部很難進(jìn)行均質(zhì)。在80%這樣的根部樣品中，必須要提取出足夠量的病原DNA，才可以用實(shí)時(shí)PCR進(jìn)行定量分析。而且，由于PCT SPS是一個(gè)封閉系統(tǒng)，樣品不會(huì)受到采用研磨方法時(shí)污染。PCT SPS在種質(zhì)篩選、食品究全評(píng)估、宿主細(xì)胞和微菌核酸分別描述方面有著重要的作用和*的優(yōu)勢(shì)。

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